FAS試劑盒異常時,最常見3個排查
發表時間:2025-12-24
FAS試劑盒異常時,最常見3個排查點如下:
試劑相關問題:檢查試劑是否過期、變質或保存不當。特別是凍干標記物,需確保按照瓶上標簽用蒸餾水準確溶解,并在2-8℃最多存放兩周。
操作步驟問題:確認實驗操作步驟是否正確,包括試劑加入順序、溫育時間等。例如,稀釋標記物時應先在塑料瓶中加入較多體積的實驗緩沖液,再加入標記物,并確保完全混合。
設備與環境問題:檢查實驗設備(如酶標儀、移液器等)是否正常工作,以及實驗環境是否符合要求(如溫度、濕度等)。確保實驗緩沖液標簽正確,標記物使用前1小時內用對應試劑盒內的實驗緩沖液按比例稀釋,并且稀釋標記物必須使用一次性塑料瓶。
反應溫度與儀器參數(確保“檢測條件正確”)
溫度每偏離37℃±1℃,FAS活性波動10%;儀器波長錯設(如450nm而非340nm)會直接導致“測不到信號”,這是最容易被忽略的“低級錯誤”。
溫度校準:用溫度計實測水浴鍋/金屬浴溫度(而非依賴設備顯示),確保37℃±0.5℃;反應管需完全浸入水中(避免漂浮導致局部溫度低)。
儀器設置:
波長必須為340nm(NADPH的特征吸收峰);
比色皿光徑是否為1cm(若用0.5cm,需在計算公式中修正d=0.5);
分光光度計是否預熱30分鐘(開機直接測會導致讀數漂移)。
以上排查點有助于快速定位并解決FAS試劑盒異常問題。