應使用經(jīng)過校準的洗板設備
自動洗板機比手動洗板更具重復性，但需定期檢查噴嘴是否堵塞、吸液是否徹底，并校準洗液分配量。建議每次實驗前進行空板測試，確認各孔洗液體積均勻，避免因設備誤差導致局部清洗不充分。
洗液配制需精確統(tǒng)一
緩沖液的pH值、離子強度及表面活性劑濃度都會影響洗滌效果。建議使用現(xiàn)配洗液，若需保存，應標注配制時間并避免反復凍融。同時，洗液溫度需與實驗環(huán)境平衡，過冷或過熱可能導致蛋白非特異性結(jié)合。
洗滌次數(shù)和時間也需嚴格把控
通常推薦3-5次洗滌，每次浸泡時間10-30秒，但需根據(jù)具體試劑盒要求調(diào)整。過度洗滌可能造成包被抗原脫落，而洗滌不足則易殘留未結(jié)合物質(zhì)。可通過預實驗優(yōu)化條件，并在標準操作程序（SOP）中明確記錄參數(shù)。
板孔邊緣效應需特別注意
洗板時邊緣孔易因表面張力導致液體殘留，可適當增加邊緣孔的洗滌次數(shù)，或在吸液時傾斜板條確保液體完全移除。實驗過程中還應避免板條長時間暴露于空氣中，防止干燥導致背景升高。
建議引入陰性對照和空白對照監(jiān)控洗滌效果
若對照孔顯色異常，可能提示洗滌不徹底或洗液污染。定期培訓操作人員，并通過重復性實驗評估批次間差異，進一步優(yōu)化流程。
