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免疫熒光技術實驗步驟：
一、準備好試劑與儀器：
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待檢標本片上，十分鐘后棄去，使標本保持一定濕度。
2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液，使其完全覆蓋標本，置于有蓋搪瓷盒內，保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS沖洗后，再按順序過0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分鐘，并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片，用濾紙吸去多余水分，但不使標本干燥，加一滴緩沖甘油，以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。

英文名稱   Anti-ZNF474/ZFP106
中文名稱  鋅指蛋白474抗體
濃    度  1mg/1ml 
規 格  0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來源  Rabbit
克隆類型  polyclonal 
交叉反應   Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse 
產品類型     一抗
別    名  zinc finger protein; ZFP106; DKFZp451A239; FLJ34610; FLJ45841; SH3 domain binding protein 3; SH3BP3; Zfp 106; Zinc finger protein 106 homolog (mouse); Zinc finger protein 106 homolog; Zinc finger protein 474; ZNF474.
研究領域   細胞生物 染色質和核信號 轉錄調節因子 鋅指蛋白
蛋白分子量   predicted molecular weight: 207kDa
性    狀  Lyophilized or Liquid 
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human ZNF474 C-terminus
亞    型  IgG 
純化方法  affinity purified by Protein A 
儲 存 液   0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1%
產品應用    WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500

抗體制備：

1.材料與試劑
  a．提取的動物 Ig
  b．弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
  c．青霉素和鏈霉素
  d．實驗動物 兔
  e．其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試，查看免疫效果。
5、如果免疫成功，殺死實驗活體，采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清（無菌采制）

抗原準備：
經常使用的抗原有：偶聯多肽、偶聯的小分子或化合物、天然或重組蛋白等等。
對可溶性抗原而言，為了增強其免疫原性或改變免疫反應的類型、節約抗原等目的，通常采用加佐劑的方法以刺激機體產生較強的免疫應答。
多克隆抗體和單克隆抗體的區別：
由一種克隆產生的特異性抗體叫做單克隆抗體。而同一種抗原決定簇，在機體內也可以由好幾種克隆來產生抗體，形成好幾種單克隆抗體混雜物，稱為多克隆抗體。多克隆抗體是由異源抗原（大分子抗原、半抗原偶聯物）刺激機體產生免疫反應，有機體漿細胞分泌的一組免疫球蛋白。
效價測定：采用瓊脂擴散法。
⑴ 將血清倍比稀釋，加入外周孔。
⑵ 中間孔加動物 Ig。
⑶ 37℃濕盒瓊擴24 小時后觀察結果。 

實驗原理：

（1）特異性結合抗原：抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞，通常需要補體或吞噬細胞等共同發揮效應以清除病原微生物或導致。然而，抗體可通過與病毒或毒素的特異性結合，直接發揮中和病毒的作用。 
（2）活補體：IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經典途徑激活補體，凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。 
（3）結合細胞：不同類別的免疫球蛋白，可結合不同種的細胞，參與免疫應答。 
（4）可通過胎盤及粘膜：免疫球蛋白G（IgG）能通過胎盤進入胎兒血流中，使胎兒形成自然被動
免疫。免疫球蛋白A（IgA）可通過及粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。 
（5）具有抗原性：抗體分子是一種蛋白質，也具有刺機體產生免疫應答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。 
（6）抗體對理化因子的與一般球蛋白相同：不耐熱，60～70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質凝固變性的物質，均能破壞抗體的作用?？贵w可被中性鹽類沉淀。在 上常可用硫酸銨或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白，再經透析法將其純化。
IFNG Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 / 恒河猴 IFNG / Ierferon Gamma 蛋白鈣鹽，英文名或英文縮寫：Calcium propionate，級別：3.5N，250-300目，規格：1克

HKC(人胚腎上皮細胞) 5×106cells/瓶×2 小腸耶爾森氏菌6-錄-1- 97% 6-Chlorohqxcnol 009-83-8

內皮細胞生長添加物ECGS水合醋酸鑭，英文名或英文縮寫：Lanthanum acetate hydrate，級別：3N，規格：1克

CLEC12A Others Human 人 CLEC12A / CLL-1 / DCAL2 人細胞裂解液 (陽性對照) 焦嶙酸鉀25克

CSSTSP1 中華鱉脾來源細胞(猩紅S)
SCGB1A1 Others Mouse 小鼠 SCGB1A1 / uteroglobin 人細胞裂解液 (陽性對照) Farnesol法呢醇500克AR，98%

KYSE150 食管鱗癌雷公藤春堿 Wilfortrine (HPLC,≥98%) 37239-48-8 10MG 標準品

ME-180人子宮頸表皮癌細胞 ME-180 human cervical epidermoid carcinoma cells McCOY's 5A+10%FBS5-拂胞嘧啶 Flucytosinq;2-xy7noxy-4-cMino-5-fluoropyriMidinq;clcobon;cncobon;cncotil;5-FC,RO 2-9915 0-82-7

HGF Protein Rat 重組大鼠 HGF / Hepatocyte Growth Factor 蛋白酚，英文名或英文縮寫：pxenolphthalein，級別：BR，95%，規格：10克

小鼠海馬趾星形膠質細胞(MA-h)(5×105) kasumi-1, 人細胞株 Human10108-87-9癸基基錄化銨Decyltrimetxylammonium chloride
NOV Protein Canine 重組狗 CCN3 / NOV 蛋白 (His 標簽)人參皂苷Rh3(標準品)Ginsenoside Rh3質量規格：HPLC≥98%，標準品

G1(發綠色熒光的小鼠胚胎干細胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠小膠質細胞RM人參皂苷Ro（標準品）Ginsenoside Ro質量規格：HPLC≥98%，標準品

心肌細胞培養基CMM-prf肉豆蔻木脂素(標準品)Myrislignan質量規格：HPLC≥98%，標準品

MDK Others Human 人 Midkine / MDK 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 肉桂醇（標準品）Cinnamyl alcohol質量規格：HPLC≥98%，標準品

EB病毒轉化的人B細胞(傣族);KM9405肉桂醛(標準品)Cinnamaldehyde質量規格：GC≥99%，標準品
鋅指蛋白474抗體 TNFSF11 Protein Human 重組人 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 蛋白物質P（1-7）Substance P (1-7)質量規格：>95%,BR

人結膜纖維原細胞(HConF)(5×105 ) HAVSMC, 人主動脈平滑肌細胞 HumanSB 203580SB203580質量規格：>98%,p38 MAPK抑制劑

人導管癌細胞;ZR-75-306-氨基-3-甲基嘌呤(3MA)；細胞自噬抑制劑3-MA;6-Amino-3-methylpurine質量規格：HPLC≥97%,autophagy inhibitor

ENPEP Others Rat 大鼠 ENPEP / Aminopeptidase A (aa 41-945) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) ；2,6-二羥基嘌呤；2,6-Dihydroxypurine；Xanthine質量規格：>99%,BR

C2C12, 小鼠肌原細胞Necrostatin1Necrostatin-1質量規格：>98%,RIP1抑制劑

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