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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號(hào) | BKP4011 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50次 |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
鼠痘病毒PCR檢測試劑盒供應(yīng) | Mouse Pox Virus(MPV)PCR | BKP4011 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢：
1. 特異性：鼠痘病毒PCR檢測試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí)，可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
人肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLDL-谷酸25克RT
A875細(xì)胞，人色素瘤細(xì)胞 阪崎腸桿菌 人紅系細(xì)胞;TF-1鋁;玫紅三羧醋銨;金精三羧醋銨 cluMinon;curintriccrboxylic ccid tricMMoniuM sclt; 749-90-2
ANGPTL7 Protein Canine 重組狗 ANGPTL7 / Angiopoietin-like 7 蛋白 (His 標(biāo)簽)D-環(huán)務(wù)基甘安醋 D-Cyclopqntylglycinq 21-86-0
KB(人口腔表皮樣癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠 SELP / selectin P / P-selectin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) A-KETOGLUTARICACID,FREEACIDα-酮戊二酸*白色至微黃色結(jié)晶或結(jié)晶粉末COLDsigma
非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS4A;Vero-HCV-NS4AN,N-二甲基-1,3-, 98+%3-Dimetxylaminopropylamine
ERAP2 Others Human 人 LRAP / ERAP2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 普魯卡因（標(biāo)準(zhǔn)品）Chloroprocaine hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：含量測定
原代平滑肌細(xì)胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基Many types of cells包裝：500/250/100ml鹽酸乙哌立（標(biāo)準(zhǔn)品）Eperisone hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：含量測定
PDGFRB Others Human 人 PDGFRB / CD140b 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 孕三1酮（標(biāo)準(zhǔn)品）Gestrinone質(zhì)量規(guī)格：含量測定
MDBK (NBL-1) 牛腎細(xì)胞西尼地平(標(biāo)準(zhǔn)品)Cilnidipine質(zhì)量規(guī)格：HPLC>97%,標(biāo)準(zhǔn)品
CM-H002人肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL西尼地平Cilnidipine質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
鼠痘病毒PCR檢測試劑盒供應(yīng)人細(xì)胞;A549 [A-549] 人腦成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL5-O-去甲基奧美拉唑硫化物5-O-Desmethyl Omeprazole Sulfide質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞cDNAHHSEC cDNA奧美拉唑 Omeprazole質(zhì)量規(guī)格：>99%,USP33,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(MEF-mt)(5×105)奧美拉唑 （標(biāo)準(zhǔn)品）Omeprazole質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
大鼠肝細(xì)胞;IAR20氯唑沙宗Chlorzoxazone質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-A2 小鼠肝外膽管上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL氯唑沙宗（標(biāo)準(zhǔn)品）Chlorzoxazone質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞;HEC-1-B磺胺二甲氧嗪; 磺胺二甲氧基嘧啶質(zhì)量規(guī)格：>99%,ARSulfadimethoxine
人成纖維母細(xì)胞-(HDF-a)( 5×105 )磺胺二甲氧基嘧啶(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Sulfadimethoxine
人星形膠質(zhì)細(xì)胞奧斯他偉酸;奧司他韋羧酸質(zhì)量規(guī)格：>97,BROseltamivir acid
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;LoVo 大鼠輸尿管上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLalpha-熊果苷(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品alpha-Arbutin
PC-12(高分化) 大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(高分化)L-甲狀腺素鈉鹽五水化合物質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRL-Thyroxine Salt Pentahydrate
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
