|
| 產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
| 保存條件 | 低溫冷藏 |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號 | AE0492 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 組織來源 | 宮頸；上皮細胞；永生化 |
| 細胞形態(tài) | 貼壁 |
| 是否是腫瘤細胞 | 否 |
| CAS編號 | |
| 保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
| 器官來源 | 詳見說明書 |
| 免疫類型 | 詳見說明書 |
| 品系 | 詳見說明書 |
| 生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
| 物種來源 | 人 |
| 包裝規(guī)格 | |
| 純度 | % |
| 是否進口 | 是 |
使用方法：
收到細胞人宮頸上皮永生化細胞現(xiàn)貨供應后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 人宮頸上皮永生化細胞現(xiàn)貨供應
簡稱：H8
種屬：人
來源：宮頸；上皮細胞；永生化
培養(yǎng)基：1640
狀態(tài)：貼壁
產(chǎn)品規(guī)格：
單位：
貨號：AE0492
基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。
操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
5-Azacytidine 中文名：5-氮胞苷 分子式：C8H12N4O5 堿性0酸酶（AKP）檢測 Acid phosphatase (ACP) detection
5-Androsten-3β-ol-17-one ethyleneketal 中文名： 分子式：C21H32O3 酸性0酸酶（ACP）檢測 Prostate acid enzyme (PACP) detection
5-Aminouracil 中文名：5-氨基尿嘧啶 分子式：C4H5N3O2 酸性0酶（PACP）檢測 Glamine syhetase (GS) detection
5-Aminosalicylic acid 中文名：5-氨基水楊酸 分子式：C7H7NO3 胰蛋白酶1:250 250g
5-Aminoindole 中文名：5-氨基吲哚 分子式：C8H8N2 ypsin1:250,PorcinePancreas 25g
胸苷酸合成酶 英文名稱： thymidylate syhase 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： TS Pazufloxacin mesilate 163680-77-1 中文名：甲磺酸帕珠沙星 分子式：C17H19FN2O7S 度：98.0% 關(guān)鍵詞：
性激素結(jié)合球蛋白 英文名稱： Sex Hormone Binding Globulin 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： SHBG O-Benzyl-L-serine 中文名：O-芐基-L-絲氨酸 分子式：C10H13NO3 度：98.0%
型脂肪酸結(jié)合蛋白 英文名稱： Human hea Fatty Acid Binding Protein 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： hFABP n-Tritriacontan-16,18-dione 中文名： 分子式：C33H64O2 度：%
鏈球菌(ST)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T Norfloxacin lactate 中文名：乳酸諾氟沙星 分子式：C19H24FN3O6 度：98.0%
新霉素 5g Zidovudine 30516-87-1 中文名：齊多夫定 分子式：C10H13N5O4 度：98.0% 關(guān)鍵詞：
Decoquinate 18507-89-6 中文名：癸氧喹酯 分子式：C24H35NO5 兔兒茶酚胺(CA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Quinocetone 81810-66-4 中文名：喹烯酮 分子式：C18H14N2O3 兔超敏C反應蛋白(hs-CRP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Dimetridazole 551-92-8 中文名：二甲硝咪唑 分子式：C4H5N3O2 兔睪(rabbit TESTO) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進口分裝
Antipyrine 60-80-0 中文名：安替比林 分子式：C11H12N2O 兔抗酸性0酸酶5b(rabbit ACP-5b) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進口分裝
Tiamulin 55297-95-5 中文名：泰妙菌素 分子式：C28H47NO4S 兔調(diào)節(jié)蛋白(rabbit TM) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進口分裝
人宮頸上皮永生化細胞現(xiàn)貨供應乳酸（lacticacid）測定試劑盒（測血清、組織等）（比色法） Rhein 478-43-3 中文名：大黃酸 分子式：C15H8O6 度：98.0% 關(guān)鍵詞：
肉毒桿菌(E/F型)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T Withaphysalin A 57423-72-0 中文名： 分子式：C28H34O6
肉毒桿菌(A/B型)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T Withaphysalin A 57423-72-0 中文名： 分子式：C28H34O6 度：98.0% 關(guān)鍵詞：
溶酶體相關(guān)膜蛋白3 英文名稱： Human Lysosomal Associated membrane protein 3 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： LAMP3 3-Acetyl-2,5-dichlorothiophene 36157-40-1 中文名： 分子式：C6H4Cl2OS 度：98.0% 關(guān)鍵詞：
溶菌酶標準品 Standard for lysozyme Ranitidine 66357-59-3 中文名：鹽酸雷尼替丁 分子式：C13H23ClN4O3S
實驗操作：
1、培養(yǎng)瓶預包被。試驗前一天預包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復消化3次。
8、收集重懸細胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計數(shù)細胞。
9、培養(yǎng)細胞密度：調(diào)整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。
|
|
|
|
|
|
