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| 產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
| 保存條件 | 低溫冷藏 |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號 | E0480 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 組織來源 | 外周血單個核細胞 |
| 細胞形態(tài) | 詳見說明書 |
| 是否是腫瘤細胞 | 否 |
| CAS編號 | |
| 保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
| 器官來源 | 詳見說明書 |
| 免疫類型 | 詳見說明書 |
| 品系 | 詳見說明書 |
| 生長狀態(tài) | 懸浮 |
| 物種來源 | 人 |
| 包裝規(guī)格 | 瓶 |
| 純度 | 詳見說明書% |
| 是否進口 | 是 |
產(chǎn)品簡稱：PBMC 細胞
中文名稱：人外周血單個核細胞
規(guī)格：瓶
種屬：人
來源：外周血單個核細胞
培養(yǎng)基：1640
狀態(tài)：懸浮
單位:
貨號：E0480
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
PBMC 細胞 | 瓶 | E0480 |
帛科細胞培養(yǎng)器材的選擇：從培養(yǎng)量大小來講，從小到大有細胞培養(yǎng)板、細胞反應管、搖瓶、細胞培養(yǎng)瓶、細胞工廠等，更大就是反應器了。
帛科細胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積從25-225平方厘米不等，一般都經(jīng)過表面改性處理，適合細胞貼壁和生長。225ml 、175ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時用（如單克隆細胞的培養(yǎng)等），75ml的多用于一般性細胞實驗用（一般性的傳代，保存細胞，為實驗提供細胞等），25ml一般是用來復蘇細胞或細胞較少時的培養(yǎng)，還有做原代細胞時也可以做多瓶而避免交叉污染。產(chǎn)品僅用于科研
細胞培養(yǎng)的具體步驟和注意事項：
1.細胞復蘇
將凍存細胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動促進其融化。將融化的細胞移入離心管中，加入37oC預熱的DMEM完全培養(yǎng)基中（其中胎牛血清約為10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，制成細胞懸液，接種于培養(yǎng)皿/瓶中，在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.細胞傳代
帛科細胞密度達到80%~90%（過量不足，過晚細胞狀態(tài)不佳，1:2至1:10以上的比率傳代培養(yǎng)，一般1:3至1:5細胞一代，即從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時間，非細胞有絲分裂次數(shù)）時，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶（注意：消化液的量以蓋住細胞*，*消化溫度是37oC。顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察消化細胞，若胞質(zhì)回縮，細胞之間不再連接成片，表明此時細胞消化適度）進行消化，放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入適量DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進行計數(shù)，然后按照所需細胞量在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
3.細胞凍存
當細胞密度達到80%~90%時，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進行消化，放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。加入DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入lml凍存液（90%胎牛血清，10% DMSO。
一般來講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整，凍存液中加入血清一方面可以為細胞提供營養(yǎng)，另一方面可以在細胞凍存過程中提供非滲透性保護物質(zhì)，如蔗糖，白蛋白等從而更好地保護細胞），放入凍存管內(nèi)（管內(nèi)有異丙醇，以保證溫度降低的速度），立即放入4oC冰箱中凍存30min，然后放入-20oC冰箱中凍存30min，再置于-80℃冰箱內(nèi)過夜。
*天放入液氮中，可以保存至少兩年，如不放人液氮，可以保存三個月。
細胞凍存和復蘇的原則是：慢凍速融，這樣更加有利于保持細胞的活力。凍存細胞不加任何保護劑，會導致細胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生，從而使細胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機械損傷，引起細胞內(nèi)環(huán)境滲透壓，PH，電解質(zhì)等的改變，進而促使細胞死亡。
以下是公司正在熱銷的相關(guān)產(chǎn)品：
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遠志皂苷元(標準品) Senegenin 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品 小鼠巨噬細胞集落刺激因子(MCSF)ELISA試劑盒 ，英文名： MCSF ELISA Kit
月桂烯（香葉烯） Myrcene 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥80%，標準品 小鼠巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA試劑盒 ，英文名： M-CSF ELISA Kit
Stigmastane-3β,5α,6β-triol 中文名：豆甾-3β,5α,6β-三醇 分子式：C29H52O3 度：96.5% 兔基質(zhì)金屬蛋白9（MMP-9）ELISA試劑盒
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Ecdysterone 20,22-monoacetonide 中文名： 分子式：C30H48O7 度：98.0% 兔環(huán)0酸腺苷(cAMP)ELISA試劑盒
Ergosta-5,24(28)-diene-3β,7α,16β-triol 中文名： 分子式：C28H46O3 度：97.5% 兔核因子κB受體活化因子配基（RANKL）ELISA試劑盒
Qingyangshengenin 中文名：青陽參苷元 分子式：C28H36O8 度：97.5% 兔肌紅蛋白(rabbit Myoglobin) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進口分裝
PBMC 細胞Qingyangshengenin 3-O-β-D-cymaropyranosyl-(1→4)-β-D-digitoxopyranoside 1186628-87-4 中文名： 分子式：C41H58O14 HumanechinococcusaibodyIgGELISA試劑盒人包蟲抗體IgGELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
Periplocoside O 116709-67-2 中文名：北五加皮苷O 分子式：C36H56O10 組織PCTA1RE1激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
Otophylloside T 1642306-14-6 中文名： 分子式：C48H70O18 Humanpeptidylprolylisomerase(cyclophilin)-like1,PPIL1ELISAKit人肽酰脯氨酰異構(gòu)酶(親環(huán)蛋白)樣1(PPIL1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
Periplocoside M 116782-73-1 中文名：北五加皮苷M 分子式：C34H52O9 兔子可溶性調(diào)節(jié)蛋白(sTM)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Polypodine B 20,22-acetonide 159858-85-2 中文名：20,22-異丙叉基水龍骨甾酮B 分子式：C30H48O8 Human cardiac specific oponin T (c) ELISA Kit 人心肌特異性肌鈣蛋白T(c)ELISA試劑盒
注意事項：
PBMC 細胞（1）預熱培養(yǎng)用液：把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱；
（2）用75%酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺和雙手；
（3）正確擺放使用的器械：保證足夠的操作空間，不僅便于操作而且減少污染；
（4）點燃酒精燈：注意火焰不能太小；
（5）嚴格的無菌操作；
（6）貼壁細胞消化適度：消化的時間受消化液的種類、配制時間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響，消化過程中應該注意培養(yǎng)細胞形態(tài)的變化，一旦胞質(zhì)回縮，連接變松散，或有成片浮起的跡象就要立即終止消化；
（7）傳代細胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進行一種細胞的操作，每種細胞使用一套器材。避免交叉感染；
（8）傳代細胞瓶口每次打開或者關(guān)閉都需要在酒精燈上消毒。
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